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            技术文章   Article

            液相色谱仪器使用小贴士

            点击次数:667 发布时间:2016-07-25

             贮液瓶的日常维护

            清洁是保持流动相贮液瓶正常使用的关键,使用LCMS级的溶剂和试剂。陈旧的流动相和用久了的试剂应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。贮液瓶内壁定期清洗,流动相滤头定期清洗或更换。
            液相泵的日常维护
            泵的密封圈是zui易磨损的部件,密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动;单向阀的正常工作至关重要,它若发生故障,将直接影响流速的稳定性。
            日常维护应注意以下几点:
            ①使用LCMS级的溶剂和试剂;
            ②确保系统压力在正常范围;
            ③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净,防止盐沉积,系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;
            ④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。
            进样器的日常维护
            样品预处理对于防止进样针和进样阀堵塞至关重要。
              预处理常用方法:
            ①超滤;
            ②溶剂萃取/去盐;
            ③固相萃取;
            ④灌注净化/去盐;
            ⑤色谱分离;
            ⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;
            ⑦酸水解,酶解;
            ⑧衍生化。
              色谱柱的维护和保存
            ①每次工作结束,用高比例强溶剂冲洗色谱柱,冲去留在柱上的强吸附组分;
            ②净化样品,样品中的微粒会进入色谱柱,在柱头上沉积下来,造成柱压升高,柱效降低;
            ③避免撞击色谱柱,如掉落或超声震荡;
            ④柱压避免急剧变化;
            ⑤反相柱C18应保存在纯有机相或50%有机相中,一周不用要卸下,两端用堵头密封,避免干枯。
            流动相的选择
            LCMS常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等,还可以加入易挥发酸碱如甲酸、乙酸或氨水等调节pH值;LCMS体系要避免使用含磷或氯的缓冲液,含钠和钾的成分必须<1mmol/l。(盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%,含三氟乙酸<0.5%,含三乙胺<1%,含醋酸铵<10—5 mmol/l。
            样品的预处理
            从保护仪器角度出发,防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷雾针,防止污染MS,降低分析背景,排除对分析结果的干扰;从ESI电离得过程分析看,电荷聚集在液滴的表面,样品和杂质在液滴表面相互竞争,不挥发物(如磷酸盐等)妨碍带电液滴挥发,大量杂质妨碍带电样品离子气化,增加电荷中和的可能。

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